紫花地丁化学成分研究

目的 研究紫花地丁 Viola yedoensis 的化学成分。方法 运用溶剂萃取、大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱以及反相HPLC等手段进行分离纯化,利用MS、NMR光谱进行结构鉴定。 结果 从紫花地丁中分离得到7个化合物,分别鉴定为金色酰胺醇酯(1)、金色酰胺醇(2)、金圣草素(3)、黑麦草内酯(loliolide,4)、异黑麦草内酯(isololiolide,5)、金合欢素-7-β-D-葡萄糖苷(6)、金合欢素-7-O-β-D-芹菜糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷(7)。结论 除化合物4外,其他化合物均为首次从堇菜属植物中分离得到,其中化合物7作为天然产物为首次报道。     

TNF-α通过唾液酸化促进小鼠破骨细胞分化

目的 探究TNF-α促进破骨细胞分化的作用机制。方法 利用4月龄野生型小鼠与同龄TNF-α转基因鼠进行体内研究,分别收集双侧膝骨关节样本后,进行CT扫描分析骨量差异,TRAP染色及免疫荧光染色分析破骨细胞分化程度及唾液酸表达水平。体外培养破骨细胞前体细胞系RAW264.7分为3组：RAW对照组（不含药物的分化培养基处理）;RAW实验组（含有TNF-α的分化培养基处理）;RAW药物组（含有TNF-α和唾液酸酶的分化培养基处理）。体外培养3 d后进行qPCR检测,TRAP染色,唾液酸免疫荧光共定位染色分析。同时,分离培养野生型小鼠（BM对照组）和TNF-α转基因鼠[BM实验组（不含药物的分化培养基处理）,BM药物组（含有唾液酸酶的分化培养基处理）]原代骨髓源巨噬细胞,3 d后进行TRAP染色及唾液酸染色。结果 TRAP染色显示,TNF-α转基因鼠膝关节软骨下骨中破骨细胞数量较野生型小鼠显著增多（P<0.001）;其骨量/体积（BV/TV）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁厚度（Tb.Th）则显著降低（P<0.001）;而TNF-α转基因鼠软骨下骨中唾液酸与TRAP荧光共定位阳性细胞数也显著高于野生型小鼠（P=0.004）。RAW实验组唾液酸表达平均荧光强度（P<0.001）及破骨细胞形成率（P<0.001）均显著高于RAW对照组,而RAW药物组唾液酸表达平均荧光强度、破骨细胞形成率以及TRAP基因转录水平显著低于RAW实验组（P<0.001）。BM实验组较BM对照组唾液酸表达平均荧光强度、破骨细胞形成率均显著提高（P<0.001）,而BM药物组较BM实验组唾液酸表达平均荧光强度、破骨细胞形成率均显著降低（P<0.001）。结论 TNF-α可通过提高破骨细胞的唾液酸化水平进而促进破骨细胞的分化和功能。     

纳米晶仿生钙磷颗粒的理化性质及细胞相容性

背景:临床上人工合成的羟基磷灰石陶瓷颗粒被广泛用于修复大体积骨缺损,但制备过程中的高温烧结会降低羟基磷灰石陶瓷颗粒的可降解性和生物活性,限制其骨修复效果。目的:采用新型低温沉积技术制备纳米晶仿生钙磷颗粒,表征其理化性能与细胞相容性。方法:采用改良后的过饱和钙磷矿化液和重复静置重悬洗涤方式制备纳米晶仿生钙磷颗粒,以羟基磷灰石生物陶瓷颗粒为对照,通过扫描电镜、X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱仪表征两种颗粒的形貌和物相组成,通过BET-N2法、硬度和接触角测试表征两种颗粒的比表面积、孔隙度分布、硬度和亲水性行为,利用BCA法检测两种颗粒对牛血清白蛋白和胎牛血清蛋白的吸附性能。将两种颗粒或颗粒浸提液分别与人脐带间充质干细胞共培养,采用MTT法检测细胞增殖。结果与结论:①扫描电镜显示两种颗粒表面略微粗糙并伴有微小颗粒存在,羟基磷灰石生物陶瓷颗粒表面致密光滑,纳米晶仿生钙磷颗粒主要由不均匀纳米尺寸的针/板状晶体组成,并在晶体之间形成纳米孔结构。X射线衍射、傅里叶变换红外光谱显示,相较于羟基磷灰石生物陶瓷颗粒,纳米晶仿生钙磷颗粒的结晶粒小、结晶度低,含有更多的结合水和碳酸根基团。与羟基磷灰石生物陶瓷颗粒相比,纳米晶仿生钙磷颗粒具有更高的比表面积、更好的亲水性、更低的硬度与更高的蛋白吸附能力。②MTT检测结果显示,两种颗粒浸提液基本无细胞毒性,人脐带间充质干细胞在两种颗粒表面存活良好,并且纳米晶仿生钙磷颗粒表面的细胞增殖活性更强。③结果表明与羟基磷灰石生物陶瓷颗粒相比,纳米晶仿生钙磷颗粒具有更好的理化性能与细胞相容性。     

益冲消症法治疗子宫肌瘤100例

笔者自 1 994年以来 ,自拟益冲消症汤 ,对 1 3 0例子宫肌瘤患者进行临床观察 ,疗效满意 ,总结如下 :一般资料1 3 0例均系妇科检查 ,并经 B超确诊。其中 :肌层肌瘤95例 ,粘膜下肌瘤 1 0例 ,浆膜下肌瘤 2 5例 ;单个肌瘤者 83例 ,多发性肌瘤 4 7例 ;肌瘤最小 1 .3 cm× 1 .0 cm,最大6.1 cm× 5.8cm;发病时间最长者 4年 ,最短者 6个月 ;年龄最小 2 8岁 ,最大 52岁 ,平均年龄 4 2岁。 1 3 0例均已婚。治疗方法益冲消症汤组成 :白芍、党参各 3 0 g,女贞子、莪术、桃仁、山甲片各 1 5g,白花蛇舌草、白毛夏枯草、石见穿各 2 0 g,水蛭、八月扎各 9g…     

我国主要沿海地区O1群霍乱弧菌分子分型特征分析

目的 采用MLST方法及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术研究我国主要沿海地区192株O1群霍乱弧菌的种群结构、进化趋势及流行特性.方法...     

近五年中医治疗女童性早熟的研究进展

女童性早熟与肾、肝、脾功能失常密切相关,其病机复杂,兼症较多,辨证分型以阴虚火旺、肝郁化火,脾虚痰结多见。通过对近5年中医治疗性早熟的文献进行分析,以期对该病的治疗提供参考。     

基于眼动技术的VR认知训练在卒中后右脑半球损伤注意障碍患者中的康复应用

目的:评价基于眼动技术的VR认知训练在卒中后右脑半球损伤注意障碍患者康复中的疗效。方法:将40例右脑半球损伤脑卒中后注意障碍的患者随机分成2组,2组均进行常规治疗,观察组在其基础上进行眼动技术的VR认知康复训练替代常规治疗中认知功能训练。治疗前后分别采用MoCA评分,数字广度测试,字母删除测验,凝视时间评估。结果:治疗6周后,2组患者MoCA评分,数字广度测试,凝视时间均明显提高(P<0.05),而2组字母删除测验中错误删除数、总治疗时长治疗前后和组间无明显变化;治疗后观察组MoCA评分、字母删除测验中正确删除数、数字广度测试顺背数字和倒背数字、凝视时间指标改善程度优于对照组(P<0.05)。结论:基于眼动技术的VR认知康复训练可以有效改善卒中后右脑半球损伤注意障碍患者的注意功能。     

紫花地丁化学成分研究

目的研究紫花地丁Viola yedoensis的化学成分。方法运用溶剂萃取、大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱以及反相HPLC等手段进行分离纯化,利用MS、NMR光谱进行结构鉴定。结果从紫花地丁中分离得到7个化合物,分别鉴定为金色酰胺醇酯(1)、金色酰胺醇(2)、金圣草素(3)、黑麦草内酯(loliolide,4)、异黑麦草内酯(isololiol-ide,5)、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、金合欢素-7-O-β-D-芹菜糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(7)。结论除化合物4外,其他化合物均为首次从堇菜属植物中分离得到,其中化合物7作为天然产物为首次报道。     

miR-216b-5p靶向ATG5介导自噬逆转食管癌Eca109细胞的顺铂耐药性

目的：探讨miR-216b-5p 对食管癌Eca109 细胞顺铂（DDP）耐药性的影响及其作用机制。方法:采用qPCR 法检测miR-216b-5p 在食管癌细胞TE-1、KYSE-150、Eca109 和耐药细胞Eca109/DDP 中的表达水平。利用脂质体转染技术分别将miR-216b-5p mimic 及mimic NC、自噬相关蛋白5（ATG5）过表达质粒转染到Eca109/DDP 细胞中,用CCK-8、EdU 法和FCM分别检测转染后细胞的增殖和凋亡;mRFP-eGFP-LC3双荧光标记实验检测mRFP-eGFP-LC3慢病毒感染后各组细胞自噬发生情况, WB法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1和P62 表达。用荧光素酶报告基因实验验证miR-216b-5p与ATG5的靶向关系,WB法检测ATG5的表达。建立裸鼠Eca109/DDP细胞移植瘤模型,观察miR-216b-5p过表达对移植瘤生长的影响。结果：miR-216b-5p在TE-1、KYSE-150、Eca109 和Eca109/DDP 细胞中均呈低表达（均P<0.05）。过表达miR-216b-5p可显著抑制Eca109/DDP 细胞的增殖并诱导凋亡（均P<0.05）,减少细胞中自噬小体数量（P<0.05）,下调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin 1蛋白水平、上调P62 蛋白水平（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验证实miR-216b-5p靶向并负调控ATG5的表达（P<0.05）,过表达ATG5 可使miR-216b-5p mimic 对Eca109/DDP 细胞增殖、自噬的抑制作用和凋亡的诱导作用明显减弱（均P<0.05）,自噬相关蛋白P62 表达降低、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin 1 表达升高（均P<0.05）。荷瘤实验结果表明,miR-216b-5p 过表达可显著抑制裸鼠移植瘤的生长（P<0.05）。结论：miR-216b-5p过表达可逆转食管癌Eca109/DDP细胞对DDP的耐药性,其机制可能与靶向负调控ATG5表达并影响细胞自噬有关。     

高宏以导气通络法治疗耳鸣经验介绍

导气通络法是浙江省名中医高宏教授专为治疗耳鸣所创立,是导气法与通络法的有机结合应用,治疗耳鸣临床疗效显著。导气法是在耳周三穴聪耳、听宫、听会行导气手法,使针感传至耳道内,强调经气感传以提高疗效。通络法是在耳周三穴行温针灸,并结合腹针疗法、在耳后乳突附近闪罐的综合疗法,能起到疏通经络、濡养耳窍的作用,使内耳供血充足。以导气通络法为主要治法,再辅以调神九针治神及健耳操日常保健,可有效增强治疗耳鸣的效果。